SODIO

EQUIPO Nº7

El sodio es un elemento químico de símbolo Na, con número atómico 11, fue descubierto por Sir Humphry Davy. Es un metal alcalino blando, untuoso, de color plateado, muy abundante en la naturaleza, encontrándose en la sal marina y en la corteza terrestre. Es muy reactivo, arde con llama amarilla, se oxida en presencia de oxígeno y reacciona violentamente con el agua. El sodio está presente en grandes cantidades en el océano en forma iónica. También es un componente de muchos minerales y un elemento esencial para la vida.

Características principales:

·         El sodio es un metal blando, ligero y de color plateado que no se encuentra libre en la naturaleza. 

·         El sodio flota en el agua descomponiéndola, desprendiendo hidrógeno y formando un hidróxido. 

·         En las condiciones apropiadas reacciona espontáneamente en el agua.

·         Normalmente no arde en contacto con el aire por debajo de 40 °C.

Papel biológico:

• El catión sodio (Na⁺) tiene un papel fundamental en el metabolismo celular.
•  Por ejemplo, en la transmisión del impulso nervioso (mediante el mecanismo de bomba de sodio-potasio).
• Participa, además del impulso nervioso, en la contracción muscular, el equilibrio ácido-base y la absorción de nutrientes por las membranas.
• La concentración plasmática de sodio es en condiciones normales de 137-145mmol /L(mili moles / litros).  aumento de sodio en la sangre se conoce como hipernatremia y su disminución hiponatremia.

SE ENCUENTRA EN:

• El sodio es relativamente abundante en las estrellas.
•  La corteza terrestre contiene aproximadamente un 2,6% de sodio, lo que lo convierte en el cuarto elemento más abundante, y el más abundante de los metales alcalinos, y  en la sal del mar ionizado.

Hipernatremia:

• Se considera hipernatremia cuando la concentración de sodio en plasma o sangre es mayor a 145 meq/L (mili equivalentes/litros).
• Las causas principales, se deben a una acción insuficiente de la hormona vasopresina o ADH (sea por déficit de producción en hipófisis o por falta de respuesta renal), a pérdidas excesivas de agua, y a un balance positivo de sal.

El cuadro clínico:

•  Depende al igual que en la mayoría de los trastornos de electrolitos, de la magnitud y su forma de instauración.
•   El síntoma predominante es la sed, que puede acompañarse de poliuria (aumento en el volumen de orina), diarrea y sudoración.

Hiponatremia:

• Se considera hiponatremia cuando la concentración de sodio en plasma es menor a 135 meq/L (mili equivalentes/litros).
•  Las causas principales incluyen: pérdidas grandes de sodio (por uso de diuréticos, diuresis osmótica o perdida de solutos a través de la orina que arrastran agua y sodio.

El cuadro clínico:

Entre los síntomas más comunes están, náuseas, vómitos, calambres musculares, alteraciones visuales, cefalea, letargia.

CALCIO

El calcio es el elemento químico con el símbolo Ca y número atómico 20. Tiene una masa atómica de  40.078. Calcio es un metal alcalinotérreos gris suave y es el quinto más abundante elemento en masa en la corteza terrestre.

·         El calcio, con una densidad de 1.55 g/cm³, es el más ligero de los metales alcalinotérreos.

·         El calcio es también el quinto más abundante ión disuelto en agua de mar por molaridad y masa, después de sodio, cloruro de magnesio y sulfato.

·         El calcio es esencial para los organismos vivos, especialmente en fisiología celular, donde el movimiento de los iones de Calcio Ca²⁺⁺ dentro y fuera del citoplasma funciona como una señal para muchos procesos celulares.

·         El calcio es el quinto más abundante elemento en masa en el cuerpo humano, donde es un mensajero iónico celular común con muchas funciones y sirve también como un elemento estructural en el hueso.

Función extracelular e intracelular

• El calcio intracelular cumple varias funciones: contracción muscular, secreción hormonal, metabolismo del glucógeno y división celular.
• El calcio extracelular es la fuente de mantenimiento del calcio intracelular, algunas de las funciones del calcio extracelular son: proveer calcio iónico para la mineralizaron ósea, participar en la cascada de la coagulación y mantener el potencial de membrana plasmática.

¿Dónde se encuentra?

·         Se encuentra en el medio interno de los organismos como ion calcio (Ca²⁺) o formando parte de otras moléculas; en algunos seres vivos se halla precipitado en forma de esqueleto interno o externo. Los iones de calcio actúan de cofactor en muchas reacciones enzimáticas, intervienen en el metabolismo del glucógeno, y junto al potasio y el sodio regulan la contracción muscular. El porcentaje de calcio en los organismos es variable y depende de las especies, pero por término medio representa el 2,45% en el conjunto de los seres vivos; en los vegetales, sólo representa el 0,007%

• Una excelente fuente de calcio son los lácteos: la leche, el queso, los yogures, la mantequilla, etc. Existen hortalizas y verduras que pueden aportar es mineral: el brócoli, las habas, la berza, las cebollas, la col, la acelga, el repollo, los espárragos o la espinaca. En cuanto a los pescados, se recomienda el salmón, el marisco o las sardinas

Características principales

·         El calcio es un metal alcalinotérreo, arde con llama roja formando óxido de calcio. Las superficies recientes son de color blanco plateado pero presenta un cambio físico rápidamente, cambiando a un color levemente amarilla expuestas al aire y en última instancia grises o blancas por la formación de hidróxido al reaccionar con la humedad ambiental. Reacciona violentamente con el agua en su estado de metal (proveniente de fábrica) para formar hidróxido Ca(OH)₂ desprendiendo hidrógeno. De lo contrario en su estado natural no reacciona con el H₂O

Patología

La hipocalcemia es el trastorno hidroelectrolítico consistente en un nivel sérico de calcio total menor de 2.1 mmol/L u 8.5 mg/dL en seres humanos, y presenta efectos fisiopatológicos. También puede ocurrir como consecuencia de disminución de la fracción del calcio ionizado: los niveles bajos de calcio incrementan la permeabilidad de la membrana neuronal a los iones sodio, provocando una despolarización progresiva que incrementa la posibilidad de potenciales de acción, observándose un incremento del nivel de contracción muscular o incluso tetania

·         La hipercalcemia es el trastorno hidroelectrolítico que consiste en la elevación de los niveles de calcio plasmático por encima de 10.5 mg/dL La hipercalcemia puede producir trastornos del ritmo cardíaco, así como un aumento en la producción de gastrina y úlceras pépticas.

·         La osteoporosis es una enfermedad que afecta a los huesos y está provocada por la disminución del tejido que lo forma, tanto de las proteínas que constituyen su matriz o estructura como de las sales minerales de calcio que contiene. Como consecuencia de ello, el hueso es menos resistente y más frágil de lo normal, tiene menos resistencia a las caídas y se rompe con relativa facilidad tras un traumatismo, produciéndose fracturas o microfracturas. La densidad mineral de los huesos se mide mediante una prueba médica que se llama densitometría ósea.

CLORO

¿QUE ES EL CLORO?

El cloro es un mineral esencial para nuestro organismo. Lo absorbemos a través del intestino delgado y encontramos en nuestro cuerpo sus mayores concentraciones en el fluido cerebro-espinal. Se regula y excreta por la orina, el sudor y el intestino. Está presente en forma de compuesto con el Sodio y el Potasio. De hecho está tan íntimamente relacionado con el Sodio que si en nuestro cuerpo está elevado el Sodio, también lo estará el Cloro y viceversa.

FUNCIONES QUE DESEMPEÑA:

•Lo necesitamos para poder mantener en buen estado las articulaciones.

•Es un regulador del equilibrio ácido-base de los líquidos del organismo.

•Regula la presión que permite a los fluidos corporales entrar y salir a través de las membranas celulares.

•Acompañado siempre del Sodio y del Potasio, regula el balance electrolítico.

•Estimula la producción de ácido clorhídrico, necesario para la digestión de los alimentos.

•Favorece la depuración del hígado.

SU DÉFICIT PUEDE PROVOCAR:

•Alteraciones en la digestión, articulaciones y en los tendones

•Intoxicación hepática.

•Pérdida de piezas dentales y de pelo.

•Dificultad en las contracciones musculares.

•Alteraciones en el equilibrio del Sodio y Potasio

CAUSAS QUE FAVORECEN SU DEFICIENCIA:

•Alteraciones del Sodio y el Potasio.

•Enfermedades gástricas.

•Enfermedades hepáticas.

•Mala o desequilibrada alimentación.

VALORES NORMALES:

•       Un rango típico normal es de 96 a 106 miliequivalentes por litro (mEq/L).

•       Nota: los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios. Hable con el médico acerca del significado de los resultados específicos de su examen.

SIGNIFICADO DE RESULTADOS ANORMALES:

Un nivel de cloruro superior a lo normal se denomina hipercloremia y puede deberse a:

•Intoxicación con bromuro

•Inhibidores de la anhidrasa carbónica (utilizados para tratar glaucoma)

•Acidosis metabólica.

•Alcalosis respiratoria (compensada).

•Acidosis tubular renal.

Un nivel de cloruro inferior a lo normal se denomina hipocloremia y puede deberse a:

•Enfermedad de Addison.             

•Síndrome de Bartter.

•Quemaduras.

•Insuficiencia cardíaca congestiva.

•Deshidratación.

•Sudoración excesiva.

•Succión gástrica.

•Hiperaldosteronismo.

FOSFORO

¿Qué es el fósforo?

El fósforo es un elemento químico de número atómico 15 y símbolo P.  Es un no metal multivalente perteneciente al grupo del nitrógeno que se encuentra en la naturaleza. Es muy reactivo y se oxida en contacto con el oxígeno. El elemento se almacena en rocas fosfatadas y a medida que estas son erosionadas se van liberando compuestos fosfatados hacia el suelo y el agua. Luego son absorbidos por las plantas, a través de las raíces, incorporándose a los componentes vivos del sistema, a medida que pasan por los distintos niveles tróficos. Una vez que los organismos (plantas o animales) mueren, se descomponen y se libera el fósforo contenido en la materia orgánica.

Características principales

·         El fósforo es un componente esencial de los organismos.

·         Forma parte de los ácidos nucleicos (ADN y ARN).

·         Forman parte de los huesos y dientes de los animales.

·         En las plantas en una porción de 0,2% y en los animales hasta el 1% de su masa es fósforo.

·         El fósforo común es un sólido.

·         De color blanco, pero puro es incoloro.

·         Un característico olor desagradable.

·         Es un no metal.

·         Emite luz por fosforescencia.

Alimentos en los que está presente

v  Cereales y derivados: Avena, harina de trigo, pan integral, arroz blanco.

v  Verduras y hortalizas: Guisantes, alcachofa, champiñón, col.

v  Legumbres Soja en grano, lentejas, judías, habas, garbanzos.

v  Frutas Uva pasa, ciruela seca, higos secos, dátil seco, coco.

v  Frutos secos: Pistacho, almendra, cacahuete, nueces, piñones, almendra.

v  Lácteos y derivados Todos los quesos, leche en polvo.

v  Carnes: caza y embutidos Hígado, pavo, pato, caballo, buey.

v  Pescados, mariscos y crustáceos Bacalao seco, gambas, truchas langostinos.

Hiperfosfatemia

Es usualmente secundaria a la incapacidad del riñón de excretar fosfato. Otros factores pueden relacionarse a la incrementada ingesta o al pasaje de fosfato desde el tejido hacia el fluido extracelular. Los signos y síntomas de hipofosfatemia pueden incluir el sistema cardiopulmonar, esquelético, gastrointestinal, neuropsiquiátrico, neuromuscular.

Los niveles por encima de lo normal (hiperfosfatemia) pueden deberse a muchas afecciones médicas diferentes. Las causas comunes abarcan:

v  Cetoacidosis diabética

v  Hipoparatiroidismo

v  Demasiado fosfato en la alimentación 

v  Enfermedad hepática

v  Insuficiencia renal

v  Demasiada vitamina D

v  Uso de ciertos medicamentos como laxantes que contengan fosfato

Hipofosfatemia

La hipofosfatemia es un trastorno electrolítico en el cual existe niveles anormalmente bajos de fósforo en la sangre. Esta condición se puede observar en muchas causas, siendo más común cuando en los pacientes con desnutrición (especialmente pacientes con alcoholismo crónico) se les da grandes cantidades de carbohidratos, los cuales aumentan la demanda de fósforo por parte de las células, removiendo el fósforo sanguíneo (síndrome de realimentación). Los niveles por debajo de lo normal (hipofosfatemia) pueden deberse a:

v  Alcoholismo

v  Hipercalcemia

v  Hiperparatiroidismo

v  Desnutrición grave

v  Muy poca ingesta de fosfato

v  Vitamina D en la dieta, lo que ocasiona raquitismo (niñez) u osteomalacia(adultez)

POTASIO

Es un metal alcalino de color blanco-plateado, que abunda en la naturaleza en los elementos relacionados con el agua salada y otros minerales. Se oxida rápidamente en el aire, es muy reactivo, especialmente en agua, y se parece químicamente al sodio. Es un elemento químico esencial.

FUNCIONES:

Junto con el sodio, regulan el balance de agua y del ácido-base en la sangre y los tejidos. Muchas enzimas requieren la presencia de potasio para activarse. Entre ellas, la enzima piruvato quinasa, importante en el metabolismo de los hidratos de carbono. De esta forma, está involucrado en el almacenamiento de carbohidratos que actúan de cosmbustible para los músculos. Es esencial en la síntesis de proteínas y ácidos nucleicos.  La mayor parte del potasio del organismo (98%) está situado en el interior de las células, en los músculos, el hígado, el hueso y los electrolitos. Solo el 2% del potasio están presentes en el líquido extracelular. La concentración del potasio en las células, es, a menudo, superior a 120 mmol/l mientras que la concentración extracelular varia entre el 3,5 y 4,5 mmol/l.

BALANCE  INTERNO DEL POTASIO:

Hormonas como la insulina, los agonistas ß-adrenérgicos y los mineralcorticoides aumentan la capturan celular del potasio, aumentando primitivamente la actividad de la Na, K. A la inversa, los agonistas a-adrenégicos y los glucocorticoides inhiben la captura celular del potasio. Factores no hormonales, como la modificación del estado ácido-base y la tonicidad del plasma, modifican la captura celular. La captura del potasio por las células después de una comida permite mantener normal la concentración del potasio extracelular esperando que la excreción renal del potasio, idéntica a los aportes, se produzca y mantenga el balance externo del mismo. 

BALANCE EXTERNO DEL POTASIO:

La principal vía de entrada del potasio, la absorción intestinal, no está sujeta a una regulación específica y la totalidad del potasio ingerido se absorbe. La excreción se efectúa esencialmente por los riñones que excretan del 90 al 95% del potasio ingerido.

DONDE SE ENCUENTRA?

Los alimentos más ricos en potasio son las frutas y vegetales, especialmente los de hojas verdes. Dentro de las frutas se destacan el plátano o bananas, las uvas, naranjas, ciruelas pasas, dátiles y el melón.

 

DEFICIENCIA DE POTASIO:

Se denomina hipokalemia o hipopotasemia a un trastorno en el equilibrio hidroelectrolítico de nuestro organismo caracterizado por niveles bajos de potasio en la sangre.

Se da por:

·         Ingesta inadecuada de potasio: en dietas bajas en potasio. Normalmente se da en personas ancianas que no pueden comer bien o tragar la comida por problemas dentales o que se alimentan mal.

·         Pérdida excesiva de potasio gastrointestinal: asociado con diarreas, vómitos severos y abuso de laxantes.

·         Pérdida urinaria de potasio dada por: uso excesivo de diuréticos tiazídicos, del asa u osmóticos

AUMENTO DE POTASIO:

Se denomina hiperkalemia a las concentraciones elevadas de potasio sérico (en el plasma). La hiperkalemia ocurre cuando la ingesta de potasio excede la capacidad que tiene el riñón de eliminarlo por orina. 

CAUSAS:

En general, una ingesta aumentada de potasio contribuye con la hiperkalemia en personas que tiene alterada la excreción renal cuando siguen dietas de bajo contenido en sodio y alto contenido en potasio (sales de potasio) y si ingieren suplementos de potasio aún en bajas cantidades.

Exceso de aporte de origen endógeno; dado por el propio organismo cuando una destrucción de los tejidos en forma aguda y masiva libera a las células de una importante cantidad de potasio hacia el medio extracelular.

Disminución de la excreción: por insuficiencia  renal aguda o crónica, por enfermedad de Addison, hiperaldosteronismo, transplante renal, por diuréticos, ciclosporinas, litio, etc.

 MANIFESTACIONES CLINICAS:

• Debilidad muscular en los miembros
• Parálisis muscular temporaria
• Hormigueo o adormecimiento de los miembros
• Malestar gastrointestinal y ulceraciones por suplementos de potasio
• Palpitaciones y arritmias cardíacas

TECNICAS

REACTIVO:

—  Reactivo de color de Sodio:

—  Solución de acetato  de uranilo, 5.3g/dL y acetato de zinc 15.4g/dL, en solución acuosa ácido acético-etanol.

—  Reactivo precipitante.

—  Solución acuosa de Acido tricloroacético (TCA), 10g/dL.

—  Estándar de sodio.

—  Cloruro de sodio,4.091 g/L, en solución TCA. Equivalente a un

—  valor de sodio de 140mmoI/L cuando se utiliza como se indica en éste método.

—  Materiales requeridos pero no proporcionados.

—  Espectofotrómetro

—  Centrifuga con alta capacidad de velocidad (>1500 rpm)

—  Pipetas exactas de 0.5 y 2.5 mL.

—  Tubos de prueba y celdillas, Agitador Vortex, Cronómetro.

—  Recolección y Preparación de la Muestra.

—  Suero: Remueva del coágulo pronto y con cuidado para evitar la

—  hemólisis.

—  Plasma: Utilice como anticoagulante heparina de litio, heparina de amonio u oxalato de litio.

—  Orina: Diluya una porción de orina de 24 horas 1:10 (1+9) con

—  agua destilada. Dependiendo del contenido de sodio, se puede

—  requerir una dilución de 1:5 (1+4) ó 1:2 (1+1).

Procedimiento.

—  Preparación del sobrenadante libre de proteínas.

—  1. Añada 0.5 mL de suero, plasma u orina diluida a tubos adecuadamente marcados.

—  2. Añada 0.5 mL del Reactivo Precipitante gota a gota a cada tubo con agitación vigorosa (se sugiere usar vortex).

—  3. Déjelo reposar por 5 minutos, después centrifugue a alta velocidad por 5 – 10 minutos.

Procedimiento.

—  1. Pipetee en los tubos marcados los siguientes volúmenes (mL), agitando rápidamente después de cada adición del reactivo de Color.

—  3. Incube los tubos por 10 minutos a temperatura ambiente 288-298 K (15– 25 °C).

—  4. Después del periodo de incubación, mezcle fuertemente y centrifugue a alta velocidad por 5 minutos.

—  5. Transfiera con cuidado el sobrenadante de cada tubo a la celdilla apropiada.

6. Con el espectrofotómetro a 420 nm calibre a cero el instrumento con agua. Lea y registre la absorbancia del blanco de Reactivo (RB), del Estándar (s) y de la Muestra (U) en 30 minutos

Control de calidad:

—  Se debe incluir en cada serie de ensayos un suero control y/u orina analizado para el contenido de sodio por este método, fotometría de flama, o electrodo ión-selectivo.

—  Para esta prueba se recomienda correr los controles Ser-T-Fy I y

—  II de Stanbio.

Resultados.

—  Lo valores se derivan del siguiente cálculo:

—  Sodio en suero, plasma u orina (mmoI/L)=

—  Abs(RB) – Abs(U) X 140

—  Abs(RB) – Abs(S)

—  Donde Abs (RB), Abs (U) y Abs(S) representan las absorbancias del Blanco de reactivo, Muestra y Estándar respectivamente, y 140 es el valor equivalente del estándar de sodio en mmoI/L.

Calcio (Ca)

Prueba Fotocolorimétrica para Calcio

Método: Los iones de Calcio reaccionan con o-cresolftaleina-complexona , en un medio alcalino, para formar un complejo de color púrpura. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la concentración de calcio en la muestra

—  CONTENIDOS

BUF      100 ml de solución Buffer          0.2mol/l

              Buffer lisisna (pH 11.1)              

              Azida de Sodio )                          0.095%

RGT      100 ml de reactivo de color        14mmol/l

              8-hidroxina                                 0.1mmol7l

              o-cresolftaleína-complexona    50mmol/l

              Ácido clorhídrico

STD      3 ml estándar

              Calcio II                        8mg/dl o 2mmol/l

              Azida de Sodio                                 0.095%

—  Preparación de los reactivos: Añadir RGT a un volumen igual de BUF según se requiera, mezclar y dejar reposar por 30 min.  A temperatura ambiente antes de su uso.

—  Muestra: Suero o plasma heparinizado.

ESQUEMA DE PIPETEO:

TECNICA DEL POTASIO

El método presentado para la determinación de potasio se basa en la técnica turbidimetrica publicada por Hillman y Beyer en 1967. Los resultados coincidían favorablemente con aquellos obtenidos por fotometría de flama y fueron adecuados para la detección rápida de híper e hipokalemia en ausencia de un fotómetro de flama o electrodo ion-selectivo. Los iones potasio en un medio alcalino libre de proteínas reaccionan con el tetrafenilborato de sodio para producir una suspensión turbia finamente dispersa de tetrafenilborato de potasio. La turbidez producida es proporcional a las concentraciones de potasio.

REACTIVOS

-Reactivo de borato de potasio.

Solución acuosa de tetrafenilborato de sodio, 0.2 moI/L

-Reactivo de hidróxido de Sodio.

Hidróxido de sodio acuoso, 2.0 moI/L

-Reactivo de TCA Precipitante.

Solución acuosa de ácido tricloroacético (TCA) 0.3 moI/L

-Estándar de Potasio (Equivalente a 4.0 mmoI/L).

Solución de cloruro de potasio en TCA acuoso (0.3 moI/L)

MATERIAL REQUERIDO

*Espectrofotómetro

*Centrifuga

*Pipeta automática

*Vasos graduados, probetas o pipetas.

*Tubos de prueba o celdillas

PROCEDIMIENTO

Preparación del sorbrenadante de libre de proteínas.

1. Añada 0.05 mL de suero, plasma u orina diluida a tubos

Previamente etiquetados.

2. Añada 0.5 mL de Reactivo TCA precipitante gota a gota a

Cada tubo mezclado vigorosamente (de preferencia utilizar

vortex).

3. Déjelo por 5minutos, después centrifugue a alta velocidad por

5 – 10 minutos.

Procedimiento de la prueba

1. Añada el estándar o el sobrenadante claro en la mitad de la superficie del reactivo de trabajo, asegúrese que cada celdilla sea mezclada con cuidado antes de proseguir con la siguiente muestra, de acuerdo al siguiente esquema:

Nota: Puede utilizar todos los volúmenes al doble si el instrumento que utiliza requiere volúmenes mayores a 1.0 mL.

1. Incube todas las celdillas a temperatura ambiente por 5 Minutos.

2. Lea S y U contra RB a 580 en un intervalo de 60 minutos. Control de calidad: En cada corrimiento de muestras se deb incluir un control de suero y/u orina ensayados ya sea por este método, fotómetro de flama o electrodo ión selectivo.

RESULTADOS

Los valores se pueden derivar por la siguiente ecuación:

Potasio en suero, plasma u orina (mmoI/L)=Au x 4

As

Orina Potásica (mmol/L x Volumen de 24 h (mL)

                                   1000

Donde Au y As son los valores de absorbancia de la muestra y

Estándar, respectivamente, y 4 es la concentración del estándar.

VALORES ESPERADOS

 Rango Normal: Suero 3.6-5.5 mmol/L

Plasma 3.5-4.8 mmol/L

Orina 26-123 mmol/24h (varía con la dieta).

TECNICA DEL CLORO

Fundamento:

Los iones de cloruro del seuro se titulan con una solucion valorada de nitrato de mercurio en presencia del indicador difenilcarbazona. Los iones Hg++ se combinan con los iones Cl- , el exceso de Hgque no reacciono con los iones clouros se combina con el indicador difenilcarbazona para formar un complejo de color violeta azulado.

Material:

·         Equipo para la toma de muestra

·         Perrilla para pipetear

·         Gradilla

·         Tubos de ensayo

·         Balanza analitica

·         Muetra: suero sanguineo

Reactivos:

1.       Solucion de difenilcarbazona (1mg/ml): Disolver 50 mg de difenilcarbazona en 50 ml de alcohol etilico, agitar y usar.

2.       Solucion de nitrato de mercurio (0.015N). pesar 3 gr de nitrato de mercurio monohidratado y disolverlos en 300 ml de agua destilada. Agregar inmediatamente 2.6 ml de acido nitrico y aforar a 1000ml.

3.       Agua destilada

4.       Solucion estandar para cloruros

Procedimiento:

Reactivos:	Estándar (100mEq/L):	Problema (paciente):
1-Suero	---------------	0.2 ml suero
2-Estandar de cloruros	0.2 ml de estándar	-----------------
3-Agua destilada	1.8 ml de agua destilada	1.8 ml de agua destilada
4-Difenilcarbazona	0.6ml	0.6ml
5-Nitrato de mercurio	Fracción de 0.01ml***	Fracción de 0.01ml***

***Mezclar y continuar añadiendo nitrato de mercurio hasta la aparición de color violeta azulado.

Calculos:

Concentracion de cloruros= volumen de Hg(NO3)2 utilizado para titular de la muestra (en ml)  X100

(en mEq/L)                   Volumen de Hg(NO3)2 utilizado para titular el estandar (en ml)

Valores normales de cloruros en suero. 96 a 16 mEq/L

TÉCNICA DEL FOSFORO INORGÁNICO:

El fosforo reacciona con el molibdato de amonio en presencia de acido sulfúrico para producir un complejo de fosfomolibdato no reducido. El incremento de la absorbancia a 340nm es directamente proporcional a la concentración de fosforo inorgánico en la muestra.

Recolección y preparación de la muestra:

La muestra de elección deberá ser un suero fresco, claro y no hemolizado. Las muestras podrán guardarse hasta 7 días a una temperatura de 2-8ºC y hasta por 6 meses a una temperatura de -20 a 0ºC.

Preparación del reactivo:

El reactivo de trabajo se prepara combinando los volúmenes iguales del reactivo de molibdato de fosforo y del reactivo catalizador del fosforo. Bien mezclado antes de usarlos.

Materiales:

·         Reactivo de trabajo.

·         Un anazador que sea capaz de leer la absorbancia con exactitud.

·         Cubetas de 1 cm o una celda de flujo que transmita luz a 340nm.

·         Tubos de ensayo del tamaño adecuado.

·         Pipetas del tamaño adecuado.

·         Agua des ionizada.

·         Un cronometro apropiado.

Procedimiento:

·         Prepare el volumen requerido de reactivo de trabajo de fósforo.

·         En tubos de ensayo por separado, pipetee 10 µL de agua des ionizada, estándar de fosforo o del suero a ser analizado.

·         Agregue 1.0 mL del reactivo de trabajo del fosforo y mezcle.

·         Incube la mezcla por 2 minutos a una temperatura de 18-26ºC, por un minuto a 37ºC.  Determine la absorbancia del estándar (As) y de cada suero (A) a 340nm utilizando la muestra de agua des ionizada como blanco de reactivo.

Cálculos & Resultados:

Fosforo en mmol/L (mg/dL)=  x concentración del estándar.

A= absorbancia de la muestra desconocida.

AS= absorbancia del estándar.

La concentración del fosforo inorgánico se expresa en mmol/L (mg/dL).

Valores esperados:

0.97- 1.45 mmol/L (3.0-4.5mg/dL). Se sugieren estos valores como referencia. Se recomiendan que cada laboratorio establezca el rango normal para el área en que esta localizado.